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NC3RS:国家替代和减少动物的替代和减少中心
指导

血液采样:豚鼠

在豚鼠中取样血液的方法,涵盖了非手术,外科和终末技术。

一般原则

你应该阅读血液采样页面的一般原则在尝试任何血液采样程序之前。

血管插管(手术)

技术

血管插管应在需要重复样品时考虑,因为它可以避免在任何一个地点上进行多个针头条目。它适用于所有豚鼠菌株中的使用,可用于从股动脉和静脉,颈动脉,颈静脉,静脉静脉,腔静脉和背主动脉中获取血液。需要手术并适当麻醉和镇痛应用于最大程度地减少造成的疼痛。恰当的无菌技术应用于防止手术后感染。应允许豚鼠在采集血液样本之前恢复其术前体重。请参阅下面的此技术。

套管在脖子的颈背上(通过夹克和系绳系统)外观。夹克会导致肿胀和皮肤磨损,豚鼠需要定期且详细的观察以发现任何问题。使用皮下访问端口的使用可能更合适,因为它们消除了未从动物进行采样的时期内对束缚系统的需求。

夹克和系绳系统可以限制自由运动,并且在手术后可能需要单独将豚鼠饲养。笼子,床上用品和环境富集需要适当,以防止系绳被纠缠并受伤。此外,床上用品需要无沙。

小型插管会增加血液凝结的风险(大型套管会擦拭血管壁)。为了防止这种情况,套管需要定期维护(例如,使用适当的锁定解决方案进行常规冲洗。请参阅我们的防止血栓形成部分以获取更多信息)。

应该收集血液无菌。通常,每个样品可以服用0.1-0.5 mL。取决于样品量而且科学目的,可以在两个小时内最多六个样本或在24小时内最多20个样品。抽血后应将带有抗凝剂的无菌盐水冲入套管中,以防止血液凝结。然后将销钉插入套管的外部端,从而阻止血液流动。无菌锁定解决方案可以用来锁定一系列样品后锁定套管,从而避免经过几天的时间。

以下应每天检查以下内容:

  • 与夹克接触的皮肤应检查是否有磨损。
  • 夹克应检查是否紧绷。
  • 应对伤口部位检查感染/瘀伤/肿胀/出血。
  • 应检查套管的通畅性(无堵塞)。
  • 豚鼠的重量(请记住,重量将包括设备的重量)。

以上任何一种的变化都可能需要兽医建议或治疗,或者可能表明已经达到了人道的终点并应采取适当的措施。

概括

考虑 推荐
样品数量 建议在两个小时的时间内最多可以采集六个样本,具体取决于样品量。
样品量 0.1-0.5 ml
设备 23G -25克套管
员工资源 需要一个人服用血液样本。只要单个动物必要,就需要进一步的员工资源来进行手术,术后护理以及手术后的每日动物观察。
不利影响
  • 感染1-5%
  • 出血1-5%
  • 阻塞套管1-5%
  • 夹克周围肿胀1-5%
  • 夹克1-5%的皮肤疮

确保使用我们的建议血管导管减少不良反应的发生率。

其他 豚鼠在开始抽血之前应处于术前体重。

资源和参考

  1. Nau R和Schunck O(1993)。横向隐静脉的插管快速方法,可以进入麻醉豚鼠中的静脉循环。实验动物27(1):23-5。doi:10.1258/002367793781082449
  2. birck mm等。(2014)。豚鼠中的非末端血液采样技术。可视化实验杂志:乔夫92:51982。doi:10.3791/51982
  3. Gunaratna PC等。(2004)。一种自动抽样器,用于同时对全身血液和脑微观鉴定物进行药物吸收,分布,代谢和消除研究的采样。药理学和毒理学方法杂志49(1):57-64。doi:10.1016/s1056-8719(03)00058-3
  4. Nolan TE和Klein HJ(2002)。啮齿动物研究中血管输注生物技术的方法。实验室动物研究学院杂志43(3):175-82。doi:10.1093/illar.43.3.175

tarsal静脉(非手术)

技术

该技术适用于所有豚鼠菌株,但难以执行,鉴于皮下组织中的高血压,除非有良好的科学依据,否则应避免使用。

tarsal静脉很容易进入。豚鼠被握住,脚受约束。通过按摩在该点上方(与动物近端)施加轻度压力,以便将血液样品用于扩张血管。每个后腿最多可以采集三个样品,每个样品可以收集0.1-0.3 mL的血液。应在后腿之间旋转样品,并应首先移除到动物(脚趾之间)的远端,并近端移至动物(朝向脚踝)。不超过六个样本,使用两个后腿应在任何24小时内采用。如果需要更多的血液,则应使用其他形式的血液采样,例如手术插管。服用血液样本的尝试次数应最小化(任何一次尝试中不超过两根针刺)。

该技术应执行无菌,包括用修剪器清除采样部位周围的头发和对采样区域进行消毒。血管周围的皮下组织中的某些出血是不可避免的,并且在采集血液样本后可能很难阻止血液流动。在软组织上的指压在软组织上应施加大约两分钟,并在抽样位点上施加到采样部位,直到流血停止之前,不应将动物恢复为笼子。将动物归还干净的笼子可以减少感染的风险。

概括

考虑 推荐
样品数量 在任何24小时内,应不超过六个血液样本。
样品量 0.1-0.3 ml
设备 23克针头或长矛
员工资源 需要两个人,一个用血液样本来限制豚鼠。
不利影响
  • 剃须5%的皮肤磨损
  • 瘀血
  • 感染<1%
  • 出血75%
其他 需要良好的动物处理来抑制豚鼠以剃须和采集血液样本。

资源和参考

  1. birck mm等。(2014)。豚鼠中的非末端血液采样技术。可视化实验杂志:乔夫92:51982。doi:10.3791/51982

隐静脉(非手术)

技术

从侧隐静脉中抽样是一种从所有豚鼠菌株中获取血液样本的相对快速方法。它不需要动物的温暖。

可以在该技术的网站上获得约束,剃须和采样的幻灯片和视频挪威实验动物科学参考中心

血液是从隐静脉的外侧静脉中收集的,后者在背侧延伸,然后在tarsal关节上侧面运行。

有意识的豚鼠应该是受约束手动或使用约束管。这可能会导致压力,因此应将约束持续时间最小化。如果使用约束管,则应适合豚鼠的大小。所有形式的限制设备应经常洗涤,以防止输入诱导的压力或交叉感染。

为了收集血液,应通过在膝关节上方施加柔和的向下压力,将后腿固定在扩展位置。这会使皮肤在脚踝上延伸,从而更容易夹紧和固定隐性静脉。请注意,不再建议用手术刀刀片剃毛,因为它可以去除皮肤的表皮层。无菌技术应该使用。麻醉不是必需的,但可以用于难以持有的动物的福利。镇静剂含有外周血管扩张剂,应低剂量,以避免穿刺部位长时间出血。服用血液样本的尝试次数应最小化(任何一次尝试中不超过三个针头棒)。血液是通过毛细作用收集到血细胞比容管或被动地进入管子的。

可以通过刺穿部位的轻柔的手指压力来阻止血液,或者简单地放松操作员在动物腿上的抓地力。在血流停止之前,不应将动物归还给他们的笼子。

任何24小时内应不超过四个血液样本。如果需要更多样品,则临时或外科手术插管应该被考虑。为多个样品除去结ab或血块。

从隐性静脉采样后,豚鼠可能会暂时偏爱肢体。

概括

考虑 推荐
样品数量 任何24小时内应不超过四个血液样本,具体取决于样品量
样品量 可以服用相当于该动物体重的0.5%的单个样本,通常可以每两周重复一次,而不会扰乱其血液学状态。或者,可以采用对应于0.05%体重的每日样品。
设备 23克针头或长矛
员工资源 如果使用约束管,则需要一个人。在使用手动约束的情况下,可能需要两个人:一个用于处理豚鼠,一个用于服用血液样本。
不利影响
  • 瘀血
  • 出血
  • 感染
  • 暂时偏爱肢体

资源和参考

  1. birck mm等。(2014)。豚鼠中的非末端血液采样技术。可视化实验杂志:乔夫92:51982。doi:10.3791/51982
  2. 下摆等。(1998)。大鼠,大鼠,仓鼠,沙鼠,豚鼠,雪貂和貂皮的血液采样,大隐静脉穿刺。实验动物32(4):364-8。doi:10.1258/002367798780599866
  3. diehl kh等。(2001)。良好的练习指南,用于施用物质和清除血液,包括路线和体积。应用毒理学杂志21(1):15-23。doi:10.1002/jat.727

腹/胸血管(末端)

技术

适合所有菌株,这是一种合适的技术,可从安乐死的豚鼠或终端下的豚鼠获得单个,大,优质的血液样本麻醉。一个样品量根据豚鼠的大小,可以收集10-15毫升。由于心脏没有刺穿,因此可以在需要避免心脏损伤的地方使用该技术。

血液是从腹主动脉,尾骨或背主动脉或腔静脉通过剖腹手术或胸腔切开术收集的。去除结缔组织和手指压力可能需要扩张血管。应缓慢拔出血液,以防止血管塌陷。深层手术麻醉是必要和正确的无菌技术应该使用。

概括

考虑 推荐
样品数量
样品量 最多15毫升,具体取决于豚鼠的大小。
设备 19G -21G
员工资源 需要一个人服用血液样本。

资源和参考

  1. 帕拉苏拉曼s等。(2010)。小型实验室动物中的血液样本收集。药理学与药物治疗学杂志1(2):87-93。doi:10.4103/0976-500X.72350
  2. 莫顿DB等。(2001)。精炼物质给药的程序。实验动物35(1):1-41。doi:10.1258/0023677011911345

心脏穿刺(终端)

技术

如果需要向腹膜灌输以收获细胞,则不应使用心脏穿刺,因为该技术会导致血液逸出进入腹膜腔。

心脏穿刺是一种合适的技术,可从安乐死的豚鼠或深端下的豚鼠获得单个,大,优质的样品麻醉如果不需要凝血参数,则不需要单独的动脉或静脉样本或心脏组织学。它适合所有豚鼠菌株。

根据豚鼠的大小以及心脏是否跳动,可以获得1-25毫升血液的样本。血液样本是通过胸腔切开术或胸部的左侧从心脏中,最好是心室取。应该缓慢拔出血液,以防止心脏崩溃。

概括

考虑 推荐
样品数量
样品量 1-25毫升,取决于豚鼠的大小
设备 20-21G
员工资源 需要一个人服用血液样本。

资源和参考

  1. 帕拉苏拉曼s等。(2010)。小型实验室动物中的血液样本收集。药理学与药物治疗学杂志1(2):87-93。doi:10.4103/0976-500X.72350
  2. 莫顿DB等。(2001)。精炼物质给药的程序。实验动物35(1):1-41。doi:10.1258/0023677011911345

附表1令人惊叹和斩首(终端)

技术

这是安乐死的附表1方法,应由人胜任这种方法。应对死动物进行令人惊叹和斩首的培训。

执行该技术的主要原因是获得大量的血液,这些血液未受麻醉药物或二氧化碳影响。如有必要,可以从树干中收集大量的血液。

适用于所有菌株,该技术应仅在极少数情况下使用,并具有出色的科学理由。ASPA将其用于1千克或以下的体重啮齿动物的用途限制。必须在斩首之前确定豚鼠,为死亡(请参阅第1(4)节阿斯帕)。

概括

概括 推荐
样品数量
血量 10-20毫升
设备 合适的锋利仪器可斩首(例如断头台或锋利的剪刀)。
员工资源 需要一个人服用血液样本。
其他 该技术需要高水平的专业知识。

有关此协议的更多信息以及是否适合您的科学目的,请咨询您部门的兽医。

斩首(终端)

  • 技术
  • 概括
  • 资源和参考

技术

该技术应仅在极少数情况下具有出色的科学依据。在英国,这项技术不是安乐死的附表1方法,因此个人和项目许可授权是必须的。

在深度末端麻醉下,从动物被斩首的部位收集了树干血。应该注意的是,其他体液和组织有污染的风险。应对死动物进行斩首的训练。

概括

考虑 推荐
样品数量
血量 最多10毫升
设备 合适的锋利仪器可斩首(例如断头台或锋利的剪刀)。
员工资源 需要一个人服用血液样本。
其他 该技术需要高水平的专业知识。

有关此协议的更多信息以及是否适合您的科学目的,请咨询您部门的兽医。

在尝试任何血液采样程序之前,您应该阅读血液采样页面的一般原则。

五个针,带有空注射器在浅蓝色背景上

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