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NC3Rs:国家动物替代、改良和减少研究中心
指导

血液采样:猪

采集猪血液的方法,包括非手术和手术技术。

一般原则

你应该读一下采血总则页在尝试任何血液取样程序之前。

隐中空(外科)

技术

猪隐静脉插管适用于小体积(< 2ml)的重复采样。该技术可作为小型猪耳静脉重复采样的替代方法。小型猪耳静脉很小,在提取样品时,如果真空过大,就会塌陷。插管也可用于输液和抽液。

猪需要这样克制为了取样,这很有压力。通过训练动物配合操作,并在安静的环境中进行操作,可以将压力降至最低。猪是一种聪明的动物,在完成任务后会记得得到奖励(如食物),这可以使它们在随后的情况下更容易处理。在可能的情况下,从称重到程序性工作的所有程序都应采用正向强化训练,以尽量减少技术员和猪的压力。

进行插管手术时,猪需要麻醉。在麻醉前,猪需要禁食,并建议将床上用品取出过夜,因为猪如果饿了可能会吃床上用品。为了提供温暖来补偿床上用品的拆除,可以提供加热灯。通过训练动物接受麻醉面罩或面罩锥(以及任何约束或解除),可以将压力降至最低。

这项技术应该进行无菌,将后腿夹紧并清洁待插管的区域。应该给后腿加热,以便扩张血管。一个装满温水的手套,并打结,可以作为一种简单的方法来扩大容器。止血带也可以用来帮助扩张血管。

一个米加®也可以使用类似的产品。该设备使用近红外光(血液吸收并被周围组织反射)来显示静脉的位置,以帮助插管的良好位置。(注意这个工具只对浅脉有用,因为它发出的光穿透深度为1.5mm)。

静脉被阻塞在套管插入区域的下方。在静脉上方用手术刀做一个小切口,这有助于放置套管,因为猪皮很硬,如果不这样做,套管可能会损坏(打结)。将套管沿静脉向上滑动,直到在套管内看到血液。此时,应该小心地取出导针,然后可以在不损坏导管的情况下将导管放置在血管中。然后盖上套管,将200 μ l的锁液(如肝素)注入套管以保持通畅。然后可以用胶带将套管固定在合适的位置。然后猪可以在家里的围栏或吊带中恢复。

所有后续的血液样本都可以从套管中取出,每次取血样时使用锁定溶液保持套管的通畅。猪可以被训练成坐在吊带上取样,也可以被温和地约束。在动物返回围栏之前和在日常检查中,取样后应检查套管。

可以收集多个样本,考虑到项目许可证和样品体积限制。

总结

考虑 建议

数量的样品

在任何24小时内倍数。

样品体积

1 - 3毫升,视猪的大小而定。

设备

18 g插管

员工资源

资源需求将根据动物的大小和所接受的训练和处理的数量而变化。至少需要两个人来控制猪,麻醉,插管和采集血液样本。

的不利影响

  • 瘀伤
  • 出血
  • 感染
  • 插管失败

其他

为了将压力降到最低,应该训练猪配合采血。如果可能的话,应在程序结束后给予奖励(如食物奖励)。

资源和引用

参考文献

  1. EttrupKSet al。(2011)。Göttingen迷你猪的基本手术技术:插管、膀胱置管、股血管置管和经心脏灌注。可视化实验杂志:JoVE(52): 2652。doi: 10.3791/2652
  2. Pinkernelle Jet al。(2009)。超声引导下在小型猪体内放置静脉导管。实验室动物38(7): 241 - 5。doi: 10.1038 / laban0709 - 241
  3. 施密特Wet al。(1988)。中心静脉导管在慕尼黑小型猪体内的药物作用和药代动力学的长期研究。欧洲药物代谢与药代动力学杂志13(2): 143 - 7。doi: 10.1007 / BF03191316
  4. Usvald Det al。(2008)。小型猪颈静脉永久性置管:治疗、临床及病理观察。Veterinarni药物53(7): 365 - 72。1992 - vetmed doi: 10.17221 /
  5. Furbeyre H和Labussiere E(2020)。超声引导下哺乳仔猪颈外静脉微创置管术。《公共科学图书馆•综合》15 (10): e0241444。doi: 10.1371 / journal.pone.0241444
  6. 克莱恩Pet al。(2019)。长期置管的方法腔jugularis在猪身上。药理学与毒理学方法杂志98: 10658。doi: 10.1016 / j.vascn.2019.106584
  7. william Diehl KHet al。(2001)。药物管理和血液清除的良好实践指南,包括路线和量。应用毒理学杂志21(1): 15 - 23。doi: 10.1002 / jat.727
  8. Pluschke我et al。(2017)。饲养猪颈静脉置管的更新方法,在口服葡萄糖耐量试验后反复采血。实验动物51(4): 397 - 404。doi: 10.1177 / 0023677216682772

颅腔静脉(非手术)

技术

颅腔静脉采样适用于所有常用品种,包括大白猪和迷你猪。这是最好的技术一只猪的单一血液样本在任何时间。它可用于获得相对大的血量(如>20毫升)。对于较小的体积,可以使用猪耳外周静脉,或在需要重复采样时进行隐静脉插管。颅腔静脉不宜多次采样,重复采样会导致胸腔入口血肿或血栓形成。可以通过颈静脉(见下文)或使用导管(手术或经皮)。

猪需要这样克制为了取样,这很有压力。通过训练动物配合操作,并在安静的环境中进行操作,可以将压力降至最低。猪是一种聪明的动物,在完成任务后会记得得到奖励(如食物),这可以使它们在随后的情况下更容易处理。在可能的情况下,从称重到程序性工作的所有程序都应采用正向强化训练,以尽量减少技术员和猪的压力。

这项技术应该实施无菌.为减少取样部位的损伤和淤青,取样次数不应超过三次。小猪应保持仰卧位;头和脖子伸直,前肢向后缩。一个可调节的v型缓冲约束器,或吊带,可以帮助保持动物的位置。大型猪(>15kg)可以在站立时放血(在犬齿后放置鼻绳,颈部向上抬起)。如果有必要将动物置于仰卧位,这应该是尽可能短的时间;五分钟应该足够采集样本了。如果动物需要更长时间的限制(长达20分钟),可以使用吸入麻醉。

针在45度处插入o入腔静脉角约1"(小型猪0.5 1")颅至胸骨稍外侧,中线向右。用手指按压纱布垫或其他吸收材料,放置在采血部位30秒至2分钟,停止血液流动。在血液停止流动之前,猪不应该被放回圈里。

总结

考虑 建议

数量的样品

通常是七天一次。

样品体积

5 - 30毫升,视猪的大小而定。抽真空系统可用于收集小样本(例如,3毫升以下的血液)。

设备

19 g - 21 g猪和20 - 21G针为小型猪(1"长为小型猪/幼猪和2"长为较大/较大的猪)。

员工资源

需要四个人,三人扶住猪的位置(头部、膝关节和前腿),一人采集血样。两到三个人就足够饲养迷你猪、习惯了这个程序的猪或吊带猪了。

的不利影响

  • 瘀伤
  • 感染< 1%
  • 出血< 1%

其他

为了将压力降到最低,应该训练猪配合采血。如果可能的话,应在程序结束后给予奖励(如食物奖励)。

当从大型猪身上取样时,正确的鼻绳位置对于减少对嘴的潜在伤害和对敏感鼻组织的过度压力是很重要的。

资源和引用

  1. william Diehl KHet al。(2001)。药物管理和血液清除的良好实践指南,包括路线和量。应用毒理学杂志21(1): 15 - 23。doi: 10.1002 / jat.727
  2. 诈骗毫米(2010)。猪的采血

耳静脉(非手术)

技术

猪耳边缘静脉穿刺适合于小体积(1-3 ml)的单次和重复采样。该技术可用于所有品种,尽管迷你猪的耳静脉很小,并且在提取样品时,如果真空过大,耳静脉可能会塌陷。

耳静脉取样的图像和猪的血液取样的其他技术可在NORECOPA网站

猪需要这样克制为了取样,这很有压力。通过训练动物配合操作,并在安静的环境中进行操作,可以将压力降至最低。猪是一种聪明的动物,在完成任务后会记得得到奖励(如食物),这可以使它们在随后的情况下更容易处理。在可能的情况下,从称重到程序性工作的所有程序都应采用正向强化训练,以尽量减少技术员和猪的压力。

应考虑对猪进行镇静,特别是当吸血量较大时。大猪可以站着放血,用鼻绳控制。迷你猪和小猪可以被抱在腿上或靠在身体上。迷你猪也可以被吊带进行采血训练,以最大限度地降低操作员和猪受伤的风险。

这项技术应该实施无菌.为减少取样部位的损伤和淤青,取样次数不应超过三次。局部麻醉霜(例如,EMLA霜)可在采血前30分钟涂抹于该部位。

管子耳静脉的部分也可以考虑作为重复静脉穿刺的一种选择,一旦插管到位,可以采集多个样本。需要使用肝素或合适的锁定溶液来保持套管的通畅,因此可能不适用于所有的研究。

耳朵应该加热,以便扩张血管。可以用温水浸泡过的棉签轻轻擦拭,然后擦干患处。另外,也可以使用酒精棉签,但需要注意的是,酒精的蒸发会使耳朵表面冷却。一个装满温水并打结的乳胶手套也可以用来扩张耳静脉进行血液采样。

静脉在耳侧表面的基部被阻塞。针头向耳底滑动。当静脉被穿刺后,流出的血液可以通过毛细管作用直接收集到合适的管子中。连续的血液样本可以通过向耳底相同的静脉和交替的耳朵进行采集。在把动物放回围栏之前,用手指压住软组织,让血流停止。一根手指应放在采血点大约两分钟。

在任何24小时内,最多可以收集8个样本,考虑到限制样品体积。

总结

考虑 建议
数量的样品 24小时内最多可达8个。
样品体积 1 - 3毫升,视猪的大小而定。
设备 21 g - 23 g针,这取决于猪的大小。
员工资源 资源需求将根据动物的大小和所接受的训练和处理的数量而变化。至少需要两个人:一个控制猪,另一个采集血样。
的不利影响
  • 瘀伤
  • 出血
  • 感染
其他 为了将压力降到最低,应该训练猪配合采血。如果可能的话,应在程序结束后给予奖励(如食物奖励)。

资源和引用

  1. 徐Jet al。(2020)。用喷射注射器从猪耳朵上采集血液,42ndIEEE医学与生物工程学会年度国际会议,蒙特利尔(加拿大),2020年7月20-24日。doi: 10.1109 / EMBC44109.2020.9175421
  2. 诈骗毫米(2010)。猪的采血
  3. william Diehl KHet al。(2001)。药物管理和血液清除的良好实践指南,包括路线和量。应用毒理学杂志21(1)全面降价。doi: 10.1002 / jat.727

颈外静脉(非手术)

技术

从颈外静脉进行静脉穿刺是猪最常见的采血途径,这是因为该技术相对容易,而且可以大量重复抽取血液样本.虽然可以采集更多的血液,但由于处理和限制过程可能造成的压力,通常每次从动物身上采集的血液少于20毫升。

颈静脉取样的图像和其他技术从猪的血液取样可在NORECOPA网站

猪需要这样克制为了取样,这很有压力。通过训练动物配合操作,并在安静的环境中进行操作,可以将压力降至最低。猪是一种聪明的动物,在完成任务后会记得得到奖励(如食物),这可以使它们在随后的情况下更容易处理。在可能的情况下,从称重到程序性工作的所有程序都应采用正向强化训练,以尽量减少技术员和猪的压力。

应该执行这个程序无菌.为减少取样部位的损伤和淤青,取样次数不应超过三次。可在采血前30分钟将局部麻醉药膏(如EMLA药膏)涂抹在患处。颈外静脉可在颈静脉沟内进入,颈静脉沟是伸颈后,前腿尾回后可见的。根据猪的大小,在胸骨头内侧肌和头臂外侧肌之间的颈静脉沟最深处垂直于皮肤插入19-21G针。在手术过程中,抓住动物是至关重要的,因为挣扎会造成颈静脉损伤的高风险。使用真空管收集样本可以通过限制抽血所需的操作水平来降低对动物和操作人员的伤害风险。要注意的是,真空管使用的针头通常太短,无法到达大母猪的颈静脉。当对较大的动物进行采样时,确保针头完整地插入,轻轻按压静脉上方的脂肪组织,以确保静脉穿刺成功。

用手指按压纱布垫或其他吸收材料,放置在采血部位30秒至2分钟,停止血液流动。在血液停止流动之前,猪不应该被放回圈里。

总结

考虑 建议

数量的样品

根据容量的不同,24小时内最多可达8小时

样品体积

20ml或更多,取决于猪的大小。真空管系统可用于收集小样本(例如3毫升血液)。

设备

19 g - 21 g猪和20 - 21G针为小型猪(1"长为小型猪/幼猪和2"长为较大/较大的猪)。

员工资源

需要四个人,三人扶住猪的位置(头部、膝关节和前腿),一人采集血样。两到三个人就足够饲养迷你猪、习惯了这个程序的猪或吊带猪了。

的不利影响

  • 瘀伤
  • 感染< 1%
  • 出血< 1%

其他

为了将压力降到最低,应该训练猪配合采血。如果可能的话,应在程序结束后给予奖励(如食物奖励)。

当从大型猪身上取样时,正确的鼻绳位置对于减少对嘴的潜在伤害和对敏感鼻组织的过度压力是很重要的。

资源和引用

  1. 诈骗毫米(2010)。猪的采血
  2. william Diehl KHet al。(2001)。药物管理和血液清除的良好实践指南,包括路线和量。应用毒理学杂志21(1): 15 - 23。doi: 10.1002 / jat.727

在尝试任何血液取样程序之前,您应该阅读血液取样页面的一般原则。

淡蓝色背景上是五根空注射器
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