评估富集的方法

• 选择要监控的行为
  • “积极”和“消极”行为
• 行为详述
  • 什么是ethogram?
  • 构建富集评价的图解
  • 使用行为详述
  • 例子行为详述
  • 时间预算
• 优点和缺点

选择要监控的行为

当通过行为观察评估环境丰富程度时，第一步是考虑你可能会看到哪些行为，以及这些行为通常被认为是健康的还是不正常的。然后，你的研究可以确定哪种形式的丰富可以最小化异常行为的风险或发生率，同时最大化正常、可取行为的发生和范围。

如果你正在引入一个丰富的项目，如一种新的避难所或巢箱，你可以监测动物使用它的程度。例如，你可以通过记录动物进入巢穴盒子的频率，啃咬它，爬到盒子上面等等。

如果你是引入短期/周期性的充实，如定时访问婴儿围栏或发作老鼠挠痒痒，你可以记录和比较动物在浓缩课程前后在笼子里的行为，以显示进入浓缩课程是如何影响它们长期的行为和福利的(即在课程之外)。例如，动物的活动量、探索行为和社会互动都可以被监控。

“积极”和“消极”行为

动物的行为相对容易观察和监测，但要解释和定义圈养环境中哪些行为是可取的就比较困难了。实验动物管理的目标应该是(尽可能地)保护动物免受痛苦的经历，同时允许它们进行“积极的”、健康的、物种典型的行为，如锻炼、觅食、筑巢和社会互动，包括玩耍。

“消极”行为包括明显异常的行为，如刻板印象。这些重复的、不变的和明显没有功能的行为通常表明动物正在努力应对不适当的环境。刻板印象的例子包括猴子的踱步行为和老鼠的棒状嘴。消极行为也可能包括非正常频率的自然行为，如过度梳理/理发。

侵略是许多实验室动物物种的一种自然行为，但通常在圈养的情况下尽量减少这种行为，以减少受伤的风险，或需要将动物分开或单独饲养。一些浓缩物被发现会增加攻击性，特别是当它们供应不足，动物必须竞争才能获得它们时，因此在对群体饲养的动物进行浓缩研究时，监测攻击性是很重要的。

行为详述

什么是ethogram?

ethogram是一个物种特定行为的列表，被分类为表格格式。当计划观察动物行为时，预先构建一个行为图谱，用来系统地记录行为。

本资源不是提供不同类型的情绪图的细节，而是侧重于与实验室环境富集相关的简单行为观察相关的信息。可以在网站上找到更多关于图腾图的信息鼠标行为详述的网站。

构建富集评价的图解

构建一个行为图式需要观察者思考他们期望看到什么行为，他们对哪些行为感兴趣，以及这些行为应该如何定义。我们在这一页的下面为实验室啮齿类动物和斑马鱼提供了一些通用的图解示例，可以提供灵感，但您的最终图解将具体到您的研究目标。

你应该从考虑你学习的目的和你感兴趣的观察开始。很可能你会想要评估浓缩项目是否被使用，以及动物如何使用它。你也可能对某些充实是否减少了刻板印象的发生或增加了攻击性的互动感兴趣。关注与这些目标相关的行为，并考虑你期望看到什么。

一旦你有了你要关注的行为的想法，你就需要定义这些行为。在进行观察之前明确定义行为对于记录行为的一致性至关重要，尤其是在团队合作时。同样重要的是，这些行为不能重叠(即它们是完全独立的类别)。

下面的示例图解可以用来观察动物是否以及如何使用一种强化物品，以及是否发生了不良行为。包括一个“代码”列，每个行为的缩写，可以让行为快速记录在数据收集表。每个参与数据收集的人都应该参与定义行为。作为一个小组讨论你们的定义，例如:每个人都清楚什么是咯咯叫的尾巴吗?好玩的追逐和攻击性的追逐有什么区别?什么是安装吗?

类别	行为	代码	定义
浓缩	爬上	电子商务	从侧面往上爬，在直立或伸展时利用侧面作支撑，在…上面移动，在…上面静止不动。
	在/休息	呃	躺着，闭着眼睛，在进行或接触浓缩物时。
	咬	如	用牙齿进行接触、咬、嚼或用嘴进行充实。
	社会	西文	与一个或多个同伴在/在/触摸丰富的过程中，温柔地互相梳理，玩耍或挤在一起。
	咄咄逼人的	EA	在与互动的任何部分进行或接触时:表现或接受攻击性行为，如:追逐、撕咬、打架、摇尾巴、攀附、攻击性梳理(用力拉毛，集中在头和肩膀上)。注意浓缩是如何使用的。
	消除	EE	排便或排尿在浓缩物或浓缩物上。
	丰富。其他	EO	在上述未定义的浓缩中或与浓缩接触中执行的任何其他行为(在注释中具体说明)
Non-enrichment	休息	NR	闭着眼睛躺着，不与物质接触。
	社会	NS	与一个或多个同伴一起玩耍或挤在一起，而不是与丰富的接触。
	咄咄逼人的	NA	作为EA但不与铀浓缩接触。
机械重复	机械重复	SY	没有明确目标的重复行为，例如嘴形动作、绕圈动作、循环动作。
不动	不动	即时通讯	清醒(睁开眼睛)，但站立或躺下时保持静止。
其他	不丰富。其他	没有	任何不属于上述任何一类的行为(如进食)。

使用行为详述

在你的研究开始之前，每个参与数据收集的人都应该至少进行一次“预演”，以试用这种方法。尝试遵循所选协议的数据收集步骤，以确保方图适合使用。如果不是，那么与您的同事讨论并做出必要的修改。

确保每个人都以相同的方式记录行为。例如，如果一只老鼠爬到浓缩物上，然后在上面排便，这应该被记录为EC还是EE?行为定义是否需要编辑以使其清晰?

当你进行研究时，要客观，坚持行为定义。这是非常重要的是一致的．

您将使用方框图为所选择的协议填写适当的数据收集表。在示例协议中有关于如何做到这一点的说明(见下面)。

对于任何协议，必要时都应作额外说明。在上面的图示例子中，在记录富集项目(EA)周围的攻击性相互作用时，添加额外的信息是很重要的。了解你正在观察的动物(即焦点动物)是否是优势个体以及富集是如何参与的是很有用的;例如，下属是逃到浓缩物内的避难所，还是侵略者将他们从物品旁赶走?保存好记录当你来解释你的数据和分享你的发现时，将是无价的。

例子行为详述

我们已经创建了可打印的图形，可以定制以满足您自己的需求。

例子行为详述
老鼠庇护所(方案A)
大鼠游戏室(方案B)
斑马鱼通用图腾图(通用方图文档第6页)
实验室啮齿类动物的一般特征图(通用字母图文档第1页)
实验大鼠的一般情绪图(通用方图文档第4页)
实验室兔的一般情绪图

你可以在以下网站找到更多的文字图:

• Mousebehaviour.org
• 挪威鼠行为表
• 猕猴的网站

时间预算

记录动物在不同行为上花费的时间可以让你观察它们的“时间预算”。时间预算是通过首先定义一个情绪图来创建的，记录在每项活动上花费的时间，并将其表示为总观察时间(或动物的一天或活动期)的一部分或百分比。查看时间预算可以进一步了解行为的数量。例如，一只动物可能会进行一次攻击和几次玩耍。然而，观察执行这些行为的持续时间可能会发现，单个攻击事件占用了90%的观察时间(即，尽管事件数量相同，但发生的消极行为多于积极行为)。更多关于创建时间预算的信息可以从鼠标行为详述网站．

优点和缺点

以谱图方法的优点是:

• 您可以比较引入强化前后的行为。
• 你可以记录各种各样的行为。
• 可以深入了解可能的福利问题(例如，在没有浓缩物品的情况下花过多时间梳洗，或在有浓缩物品的情况下增加攻击性)。
• 可以洞察到可能的改进(例如，当采用非厌恶的处理方式时，咬人事件的发生减少了，或者当允许使用游戏围栏时，过度梳理的事件减少了)。
• 几乎不需要额外的设备，并且可以在标准的家庭笼子中进行观察。
• 行为可以用视频记录下来，然后在方便的时候观察/编码。

使用这种方法时应格外小心，因为:

• 为了一致性，需要对行为进行明确的定义。例如，你会如何向同事描述“休息”或“玩耍”，以便他们记录与你的数据一致的数据?休息包括睡觉吗?还是这些行为是分开的?最近，“醒着但不活跃”被定义为生活水平低下的标志;大家都清楚这是什么样子了吗?
• 这取决于观察者如何在福利的背景下解释这些行为。例如，在丰富的存在下，更高的活动水平可能表明自信、探索行为的增加，或更焦虑、压力更大的状态。

在NC3Rs猕猴网站上，一个一小时的视频教程提供了更多关于记录动物行为方法的信息记录的行为)和这些视频野生的发现．

偏好测试(也称为选择测试)让动物在两个或更多不同的环境中进行简单的选择。它们基于这样一个假设:动物会根据自己的最佳利益做出选择，在与更高福利水平相关的环境中花费更多时间。偏好测试可提供以下选择:

• 一个标准笼子和一个装有浓缩物的笼子。
• 两种或两种以上的浓缩。
• 提供不同条件的环境(例如温度、光照强度或与其他动物接触)。

偏好测试的一个例子是，用一根管子连接两个笼子，两个笼子里都有食物、水和垃圾，但一个笼子的照明强度为100勒克斯，另一个笼子的照明强度为250勒克斯。可以测量动物在每个笼子里呆的时间和/或它们进入每个笼子的次数，并用来推断哪种光照水平是首选的。如果动物表现出对其中一种笼子的偏好，这就表明这种光照水平对动物有利，而另一种光照水平则没有，从而表明哪种光照水平最有可能使动物的福利最大化。

优点和缺点

这种方法的优点是:

• 观察可以直接进行，而不需要在引入富集之前收集数据(不像ethogram方法;见上图)
• 动物更喜欢哪种环境/丰富可以有明确的指示。
• 通过提供两个以上的选项，可以测量对几个浓缩项目的喜好程度。

使用这种方法时应格外小心，因为:

• 笼子操作需要设置不同的区域或相邻的笼子。
• 动物只有摆在它们面前的选择，可能只是选择最能减少它们的不适的选项(即福利只有适度的改善)，而不是表明它们的理想环境。
• 动物表现出的选择或偏好可能是非常主观的，受限于个体在当时的偏好。在一天的不同时间、生命阶段、季节和生殖周期的不同阶段，偏好可能会有所不同。
• 简单的偏好测试并不能表明动物拥有自己偏好的选项有多重要。为了评估这一点，需要进行动机测试(见下文)。

动机测试包括动物选择“付出代价”(例如抬起一扇加重的门或从一个缝隙中挤过去)，以获得它们想要的东西，如额外的空间，一个巢箱，或获得同质物(同一物种的其他动物)。这种类型的研究可以让研究人员深入了解实验室动物真正想要和需要的是什么，以及动物对其环境特征(包括其他动物)的重视程度。其中一些研究是基于人类在购买消费品时的行为方式——我们准备为非常想要的东西支付高价，但对我们不太看重的东西只花很少的钱或根本不花。

下图显示了一个动机测试的例子，旨在评估钻洞基质的动机强度。小鼠必须执行一个操作任务，在这种情况下，按下开关，以到达带有底物的富集笼子，而每次试验中，必须按下开关以访问底物的次数增加。老鼠不再继续按开关的点代表了它们准备为进入挖洞基质而支付的“价格”的截止点。

优点和缺点

这种方法的优点是:

• 更深入地了解动物对某一特定浓缩物品的动机。
• 它避免了偏好测试中所做的假设(见上文)，即动物是根据自己的最佳利益在选项中做出选择。
• 不同浓缩物的“价值”可以用相同的尺度进行比较(即动物愿意为获得它们而做的“工作量”)。
• 稳健的实验方法更有可能产生可发表的成果，有助于提高动物福利知识。

使用这种方法时应格外小心，因为:

• 动物必须为获得铀浓缩而付出的“代价”可能会影响它们的福利——它们必须能够自由选择“付出代价”，而不应该为获得食物、水或任何对它们的健康至关重要的东西而付出代价。
• 与简单的行为观察或偏好测试相比，更可能需要伦理批准，而行为观察或偏好测试可能不需要任何伦理批准。
• 需要一个更复杂的实验装置。

下面的示例协议提供了如何使用本网络资源中概述的方法进行环境富集评价的指导。下面提供了修改协议的一般建议。

查阅决策表帮助您选择最可能满足您需求的协议。

描述	类型	有用的文件
方案A:使用浓缩物品(带有遮蔽物的老鼠夹层) 准备:创建ethogram和游戏室 观察:每日的灵活性;约。每天5 - 40分钟	行为观察	协议A:数据采集表 协议A:查看数据(主协议文件第5页) 协议A:示例ethogram 一般鼠标行为详述(通用字母图文档第1页)
协议B:老鼠的游戏室 准备:创建ethogram和游戏室 观察:每日的灵活性;约。每天20 - 45分钟	行为观察	协议B:填写数据采集表 协议B:选项1数据收集表 协议B:选项2数据收集表 协议B:选项3数据收集表 协议B:查看数据(主协议文件第8页) 协议B:示例ethogram 一般老鼠行为详述(通用方图文档第4页)
协议C:录像记录斑马鱼的行为 准备:创建图形，设置和测试记录设备 观察:每日的灵活性;约。每天20 - 45分钟	行为观察	协议C:数据采集表 协议C:查看数据(主协议文件第6页) 一般斑马鱼行为详述(通用方图文档第6页)
协议D:偏好测试 准备:修改的笼子里 观察:每日的灵活性;约。5 - 10分钟	偏好测验	协议D:数据收集表 协议D:查看数据(主协议文件第6页)

决策表

下面哪个陈述最能描述你的情况?	选择评估
我的目标是通过引入或修改充实来解决关注的行为(例如刻板的过度修饰)。	观察行为，关注消极福利指标的频率或持续时间，考虑采用方案A、B或C。 对于明显的低福利指标，如理发，也可以在福利检查时记录数据。 观察有丰富和没有丰富的行为，并对两者进行比较。
我一般希望通过引入或改变富裕来改善福利。	观察行为，关注积极和消极的福利指标。考虑采用协议A、B或C。 观察有丰富和没有丰富的行为，并对两者进行比较。
我想知道动物们是否使用浓缩物以及它们是如何使用的。	可以采用A方案。
我想知道当给动物选择的时候，它们更喜欢什么。	偏好测试可能是合适的，为此您可以采用协议D。 一群人对可食用物品的偏好可以通过吃多少或嚼多少来表示。你可以使用一个评分系统，或者在把它们放进笼子之前和24小时后称它们的重量。这些观察可以在群体中进行，所以没有必要单独容纳个体。
我想知道对动物来说获得丰富的食物有多重要。	动机或“消费者需求”测试可能是合适的。

在网上可以找到浓缩评价的例子

参考	评价类型	研究动物	浓缩的评价	统计数据
[1]温莎和贝茨(2019)	巢得分 安全观察	老鼠	四种嵌套材料	AVOVA
[2]施罗德et al。(2014)	偏好测验	斑马鱼	不同类型的结构富集(砂石和人工植物)	Kruskall-Wallis测试;Wilcoxon测试
[3]范厕所et al。(2004)	偏好测验	老鼠	巢箱和筑巢材料	二项测试;学习任务
[4] Czezyket al。(2020)	偏好测验 行为观察	斑马鱼	不同类型的结构浓缩(塑料植物、遮蔽物、塑料睡莲垫)	方差分析
[5]李et al。(2019)	偏好测验 行为观察	小猪	音乐	方差分析
[6]蒂莉et al。(2010)	行为观察 动力测试	老鼠	更小的笼子vs更大的笼子，结构更丰富	广义线性模型
[7]温泉旅游et al。(2010)	动力测试	老鼠	各种玩具和物品(例如聚酯和毛皮覆盖的积木)	方差分析;学习任务

参考文献

[1] Windsor Z, Bate ST(2019)。评估手术安装头板的单房小鼠的筑巢材料的安全性和适用性。Heliyon5 (7): e02097。doi: 10.1016 / j.heliyon.2019.e02097

施罗德P，琼斯S，杨ISet al。(2014)。斑马鱼想要什么?社会分组、支配地位和性别对富裕偏好的影响。实验动物48(4): 328 - 337。doi: 10.1177 / 0023677214538239

[3] Van Loo PL, Blom HJ, Meijer MKet al。(2005)。通过偏好测试，对实验室小鼠使用两种商业上可获得的环境浓缩物进行评估。实验动物39(1): 58 - 67。doi: 10.1258 / 0023677052886501

zzezyk A, Burn C, Russell C(2020)。为斑马鱼群体提供隐藏空间能减少攻击行为吗?青年调查员杂志38(5)。doi: 10.22186 / jyi.38.5.43-56

[5]李霞，赵坚，赵鹏et al。(2019)仔猪对不同类型音乐的行为反应。动物13(10): 2319 - 2326。doi: 10.1017 / S1751731119000260

Tilly SLC, Dallaire, J, Mason GJ(2010)。具有抗富集刻板行为的中年小鼠表现出富集动机降低。动物行为80(3):363-373。doi: 10.1016 / j.anbehav.2010.06.008

[7]汉默LA，里德尔PM，威廉姆斯CM(2010)。使用跑道范式来评估大鼠对浓缩物体动机的相对强度。行为研究方法42(2):517-524。doi: 10.3758 / BRM.42.2.517

你可以使用上面示例协议中概述的基本原则来设计你自己的研究，取而代之的是你的研究问题、富集类型和动物。下面和单独的示例中包含了调整各个协议的想法。

收集更多的数据

增加收集的数据量通常会增加数据集的可靠性和信息量。你可以增加观察的动物/笼子的数量，观察的时间点的数量，和/或你的研究持续时间。

更多的数据意味着更多的数据输入，所以在学习过程中尽量把数据输入到电子表格中，而不是在学习结束时留给自己一个大的任务。如果您在一个团队中工作，您可以指定一个人输入数据，也可以轮流输入。

利用辅助信息

考虑是否有可能对你的研究有用的信息已经在你的动物设施中收集，或可以在日常工作中容易记录。这可以用来提供一个更全面的视角来看待动物福利，以及动物福利如何随着财富的增加而变化。许多设施例行记录，例如食物和水的摄入量、体重和状况、巢穴质量和繁殖性能。

生理数据，如远程测量的心率和血压，或皮质醇水平，如果是作为其他研究的一部分收集的，也可以向您提供。然而，仔细的解释是必要的，因为单独一个因素并不一定能给出动物福利状况的可靠指标。例如，心率加快可能表明压力水平增加，但它也可能表明与玩耍或对食物的期待有关的积极兴奋。因此，在生理测量的同时进行行为观察，并观察多个参数是一个好主意，以提供对动物福利的最佳洞察。