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NC3RS:国家替代和减少动物的替代和减少中心
指导

殖民地管理最佳实践

鼠标菌落管理最佳实践的高级简介。主题包括确认,归档和维持小鼠菌株,以及育种策略的重要考虑因素。

确认您的压力

当小鼠应变产生或导入到动物设施中时,应验证基因型和背景应变。需要记录和存储有关如何创建遗传变化(GA)菌株的详细信息(例如背景菌株,基因编辑技术,用于创建菌株,用于插入或精确缺失/突变的拷贝数,基因型的细节和测序的细节和结果)。拥有有关如何创建菌株的足够信息可以增加菌株的实用性以及使用该菌株从实验中数据的可靠性。

单核苷酸多态性测定(SNP面板)可用于确认背景应变,理想情况下,应在菌株到达时,应确认背景应变,并在维持菌落时定期确定。

归档

在内部产生或进口到动物设施内的任何新菌株都应尽快存档。这是一项应急计划,可保护应变免受极端情况下的完全损失(例如,大流行,灾难或关键人员突然疾病),如果从存档库存中获得的动物获取,则可以确保数据的重现性更大(即有限遗传漂移,因为繁殖较少)。在大多数情况下,从携带遗传修饰的男性中冷冻精子就足够了。在特定情况下,冻结胚胎可能更合适(例如,某些纯合菌株,野生育繁殖/捕获的菌株)。看方案8归档最佳实践有关存档最佳实践的更多信息。重要的是要保留当地归档和存储库的冷冻组织/菌株的详细记录。

保持压力

控制应变的完整性

当重新征收菌株或从少量繁殖动物中建立菌落时,应仔细控制动物,以维持背景菌株的完整性,从而减少未来的问题。为了获得可再现和生物学相关的数据,要考虑的特定因素包括在不同实验过程中遗传背景的潜在变化,是否有正确且一致的基因型以及这些因素将如何影响最终的实验设计。18luck新利体育官网登录

保留记录

保留应变的全面记录,以促进最佳的菌落维护。记录每个菌株的信息应包括:

  • 血统
  • 垃圾大小
  • 垃圾间隔
  • 生殖生命周期
  • 生育能力
  • 福利问题
  • 已知的表型

最小股票

维持菌落所需的库存动物数量最少取决于菌株本身(即它繁殖的繁殖程度,生殖生命周期等等,这可能会受到背景菌株和特定遗传修饰的影响)以及股票的目的。如果要保持股票维持活殖民地,则需要比出于归档目的繁殖的股票更多的动物(请参阅归档最佳实践有关存档应变的更多信息)。最小的实验库存数量高度取决于特定实验的要求,例如,是否需要杂合或纯合动物以及所需的样本量。

繁殖策略

重要的是要考虑使用每种菌株的频率以及将来对菌株进行归档和重新等化或维持繁殖菌落是否更合适。

如果应变将不超过六个月,则强烈建议将来存档应变并重新陈述(请参阅方案1)。这可以减少遗传漂移和动物的使用。

如果将菌株保持为繁殖菌落,请为菌落目的选择最合适的育种策略。例如,当手稿正在审查中,并且在审稿人要求进一步实验的情况下保持殖民地,应使用间歇性的育种策略来避免浪费动物(请参阅间歇性繁殖的例子)。

菌株的生殖生命周期

为了有效地维持菌落,重要的是要了解菌株的生殖生命周期,包括特异性最佳繁殖年龄和繁殖力。每个野生型或GA菌株都有不同的最佳育种年龄,这将为适当的育种策略提供信息 - 请参阅更多信息用于杰克逊实验室的相关资源。

刷新背景应变以避免遗传漂移

遗传漂移发生在每一代人,不能停止。封闭菌落内的重复育种将导致遗传漂移,由于背景突变的积累而导致表型的潜在损失或增益。如果允许不选中漂移,菌落将与它产生的初始近交菌株不同,可能会导致寻找适当的对照动物的问题。此外,菌落将随着时间的推移继续漂移,积累了更多的突变,并降低了在不同世代的小鼠上进行的实验的可重复性。

如果允许不选中漂移,菌落将与初始近交菌株不同。

通过将GA小鼠从受控的近交菌株(一种近交菌株每五到十代从存档的胚胎中取代的近交菌株),可以减慢漂移。这是由商业供应商定期完成的。将GA菌株作为反向交叉到受控的近交菌株是减少遗传漂移的最佳方法。在不可能的情况下,例如,当需要将菌落保存为纯合子时,重要的是要将其交还回每三到五代的近交菌株,然后再互入以产生纯合子以进一步繁殖。如果这是一个非常复杂的殖民地,具有多个等位基因,则值得在早期存档库存胚胎。

更多信息

有关杰克逊实验室殖民地管理的更多信息:

了解有关MRC Harwell专家的“有效管理遗传改变的小鼠殖民地”的更多信息。

网络研讨会演示标题幻灯片:NC3RS和Mary Lyon Center(MRC Harwell)联合网络研讨会:有效地管理遗传变化的鼠标殖民地
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