Cas9介导原代乳腺上皮细胞体外基因编辑

在英国，每8名妇女中就有1人患乳腺癌，每月有1000名妇女死于乳腺癌。乳腺癌治疗的主要挑战之一是疾病的异质性。有证据表明，肿瘤的异质性可以归因于这些肿瘤的细胞起源。例如，腔内乳腺癌被认为是由分化细胞引起的，而基底样乳腺癌(BLBC)被认为是由未分化的祖细胞和干细胞样细胞引起的。这就需要细胞类型特异性因子的表达和功能，这些因子决定细胞的命运。因此，了解正常乳腺上皮细胞的发育层次，可以为开发有效的乳腺癌亚型特异性治疗方法铺平道路。

小鼠为研究不同细胞命运调控因子如何参与乳腺上皮发育和乳腺癌发展提供了一个极好的模型。然而，随着DNA测序和癌症基因组学的进步，需要在小鼠中进行研究的候选基因的数量增加了。这导致了对进行这些研究的转基因小鼠的需求增加。在这个项目中，我们的目标是通过利用最近的技术进步来产生一种快速、经济有效和灵活的方法，直接在原代乳腺上皮细胞中标记感兴趣的基因，从而避免为乳腺癌和乳腺研究生成新的转基因小鼠的需要。我们将利用Crispr/Cas9技术在原代乳腺上皮细胞中删除或标记感兴趣的基因在体外然后直接将它们重新引入受体小鼠的乳腺脂肪区，准备进行下游分析。

我们的新方法将使我们能够研究乳腺中感兴趣的新基因，而不需要产生新的转基因小鼠，这将大大减少进行乳腺癌和乳腺研究所需的动物数量。