开发以细胞为基础的肉毒杆菌毒素和抗毒素替代分析方法

肉毒毒素和抗毒素疗法的效力测试完全依赖于小鼠致病性生物测定，即将各组小鼠通过腹腔注射暴露于毒素并监测72或96小时。由于致命终点和使用大量实验动物，小鼠LD50测定被认为是不人道的，需要新的替代方法来改进、取代和减少动物使用。更人性化的非致命性局部弛缓性麻痹试验已经开发出来，其灵敏度大约是致命性方法的10倍，但仍需要大量动物。原代细胞的使用是有限的，因为对动物的持续需求，耗时的解剖和潜在的非神经元成分污染。

避免这些限制的一种方法是开发敏感的人类细胞系模型。迄今为止，使用已建立的细胞系的基于细胞的方法未能提供敏感的功能端点，新的治疗策略仍然迫切需要新的基于人类细胞的分析。为了建立合适的人类细胞模型，人类成神经细胞瘤细胞系已在NIBSC培养中建立，并常规分化为成熟神经元。分化SH-SY5Y细胞用于检测高皮摩尔水平的A型肉毒杆菌的适用性已经通过神经递质释放测量得到了证实。

应用微电极阵列(MEAs)平台作为潜在的功能性神经毒性分析将与突触囊泡循环成像、免疫检测和神经递质释放测量并行实施。这种新方法完全不以动物为导向，不依赖于在其他应用和策略中广泛使用的任何动物实验。在体外功能性神经毒性试验提供了整个动物替代的潜力，因为它的作用模式涉及肉毒杆菌中毒的所有关键步骤。

• 2013年研究回顾:肉毒毒素检测的新方法