人工印迹抗体在驱动不必要的免疫反应中的功效

生物源性抗体是大多数免疫学研究中使用的主要试剂，而重组抗体或噬菌体源性抗体技术尚未普遍使用。针对免疫细胞受体的激动性和拮抗性抗体的产生大多使用多克隆抗体技术。

人工抗体可以通过分子印迹技术合成，在这一过程中，目标分子(或其衍生物)作为模板，在其周围排列相互作用和交联的单体并共聚形成铸状外壳。移除模板后，高亲和力结合位点暴露出来，它们在大小、形状和化学功能上与目标分子互补。分子印迹聚合物(MIPs)的固有优势包括鲁棒性、高特异性、难以生物降解和(荧光)探针在体内检测中监测相互作用。

靶向PD-1免疫检查点的抗体仅在30%的癌症患者中显示出显著的疗效，而在无应答者中缺乏疗效尚不清楚。对患者进行分层治疗的一种方法是测试免疫系统对这些抗体的反应率在体外诊断化验。然而,在体外生物单克隆抗体分析虽然可以保证特异性，但会出现相当大的批次变异，从而降低了这种方法的可行性。克服这种抗体的生物学差异和异质性的一种新方法是开发一种流线型的方法，通过人工分子印迹可能产生相同的抗体产品。

该学生项目的目的是建立一个原理模型的证明，以生成可作为人类免疫细胞PD-1受体激动剂或拮抗剂的MIPs。具体目标概述如下:

目标1:建立模型，设计针对PD-1受体的激动剂和拮抗抗体

免疫检查点蛋白PD-1的结构信息及其与配体PDL-1的相互作用已经得到了解析。PD1和PDL1的相互作用在晶体学研究中表明，这两种蛋白质都是通过各自的ig样v型结构域的大疏水表面相互作用的。最近发表的PD-1抗体大部分靶向PD-1中的两个位点:C ' /D环(位点1)和C,C '和F链(位点II)。在自然界中，位点II主要由其配体利用。

在这个目标内，

1.设计能够结合位点1(以增加抗体亲和力)和位点II的创新固相合成策略的MIPs。

2.包括用于监测纳米ip附着的荧光单体在内的单体组合将在靶标周围聚合。我们将建立原子模型来评估结合焓，并补充实验工作，这将导致高亲和MIPs的产生。

目的2:测试MIPs对PD-1受体是激动性还是拮抗性

1.产生的MIPs将被测试其在抑制或增强抗antid3和抗cd28刺激下人T细胞增殖的有效性。

2.MIP的作用模式将通过使用包括凋亡测定、T细胞细胞因子生产能力、功能性elisa和细胞内流式细胞术的测定来确定。

3.MIP功能将在抗原特异性增殖试验中进行检测(将使用HLA-A2限制性流感抗原表位)，以确定MIP在增强抗原特异性CD8+T细胞增殖方面的有效性。

这项研究将建立一个新的卫生保健技术研究领域，使我们能够产生结构上模仿生物制剂的塑料抗体，并有可能用于诊断分析。