增强小鼠全胚胎培养在出生缺陷研究中的应用

全胚培养(WEC)使啮齿动物胚胎生长在体外通过器官发生的早期阶段，克服子宫内胚胎的不可接近性。WEC允许分析外源因子对胚胎的直接影响，允许手术/其他干预，并越来越多地用于研究基因功能障碍如何导致出生缺陷。就3r而言，WEC是一种避免对怀孕的雌性啮齿动物进行操纵的有效方法。在附表1杀坝后，窝仔胚可以分配给不同的处理组，增强组间的可比性，抵消窝仔间的变异性。WEC已经被广泛应用:例如2010-14年有82篇出版物。然而，目前有几个因素限制了其更广泛的应用，这个博士研究生项目旨在适应WEC以克服这些限制。

WEC对实验室生产的大鼠血清作为培养基的依赖使一些使用者望而却步。此外，商业大鼠血清不能支持最佳胚胎发育。最近，报道了一种用于WEC的无血清定义培养基，我们的第一个目标是评估其与基于血清的培养的有效性。第二个限制是在培养中发育的胚胎的分子特征相对较差。我们将对WEC和发育中的胚胎进行直接转录组学比较在活的有机体内，采用RNAseq分析。第三个限制是缺乏在胚胎培养中诱导条件转基因表达(例如ERT2Cre)的任何方案。我们的初步研究表明，他莫西芬诱导在WEC中起作用，这一分析将扩展为一种可行的方法。通过这些研究，学生将扩展和验证WEC当代出生缺陷研究。然后，他/她将使用优化的技术，特别是诱导条件转基因表达，对Vangl2基因在小鼠脊柱裂发展中的作用进行假设驱动分析。