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裂纹IT解决方案

TruLarv Galleria mellonella -感染研究、毒性测试和药物开发的模型宿主(与Envigo合作)

大蜡Galleria mellonella幼虫在一个绿色的桶

乍一看

完成
合同日期
合同总金额
£12000
承包商(s)

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内容

概述

人们越来越需要能够弥合两者之间差距的模型在体外研究和哺乳动物研究，以提高临床前试验的预测能力和减少后期损耗。广场mellonella在过去的五年中，幼虫已被广泛用于微生物感染的非哺乳动物模型和抗菌药物筛选。最近，这种幼虫被用于测试化学毒性，可能能够在哺乳动物毒性测试之前提供更有预测性的筛选。

BioSystems Technology Ltd.开发了TruLarv;研究级广场mellonella用于化学和药物开发管道的幼虫作为评估疗效和毒性的早期筛选。TruLarv的体重和年龄是确定的，表面经过净化，饲养时不使用抗生素或其他药物，因此它们的行为比从其他来源获得的幼虫更稳定和可重复。

在CRACK IT Solutions的资金支持下，埃克塞特的生物系统技术团队正与Envigo合作，比较25种化合物的急性口服毒性测试g . mellonella利用现有的细胞培养方法数据。目的是评估TruLarv是否能比细胞培养IC50测量更准确地预测哺乳动物的LD50。

如果TruLarv获得的数据比现有的细胞培养方法更能预测哺乳动物的毒性，Envigo将提供TruLarv毒性测试服务，通过促进只选择最有希望的引物，使该模型得到更广泛的工业应用，并减少动物使用。

关于这个CRACK IT解决方案的详细信息可以在破解它的网站．

影响

本研究旨在研究蜡蛾幼虫TruLarv™的适宜性广场mellonella)作为评估化学品急性毒性的模型宿主。研究评估了30种化学物质，并与IC进行了比较50价值来源于两种不同的在体外细胞毒性试验方法(3T3 NRU和NK NRU试验，发表在OECD 129指导文件)和在活的有机体内急性口服LD50值从啮齿动物。

在这30种化学物质中，可以计算出LD值50其中19个的值。由于溶解性问题，LD50必须估计八种化学品的价值。剩下的三种化学物质不能在TruLarv中使用TM模型由于在可用溶剂中缺乏溶解度。在确定的注射部位(前前腿)皮下微量注射10 μ L test chemical进行治疗。所有处理和未处理的对照幼虫均在20 - 25°C孵育，并在攻毒和LD后24小时、48小时和72小时进行发病率评分50计算TruLarv™中的(mg/kg)值。

TruLarv™LD的危害分类50价值以全球化学品分类和标签协调系统(GHS)为基础:

  • 5类:> 2000mg /kg，无毒
  • 4类:>300 - 2000 mg/kg，弱毒性
  • 3类:>50 - 300mg/kg，中毒性-剧毒
  • 类别1 - 2:<50毫克/公斤,有毒

TruLarvTM根据已发表的急性口腔LD，准确预测了100%的化学物质(9个中的9个)被列为无毒(第5类)50值。相比之下，基于细胞的细胞毒性方法与急性口服毒性方法的一致性仅为44%(9个中的4个)，其余5种化学物质被预测为弱毒性或极毒性(1 - 4类)。对于一种化学物质(二甲基甲酰胺)，IC50两者的值在体外试验差异很大，3T3 NRU法将该化学物质归为1-2类，NK NRU法归为5类。

TruLarvTM根据急性口服LD的定义，正确预测剩下的10种化学物质中80%属于1-4类50值。然而，在确定这些化学物质属于哪一类时，它就不那么准确了。相比之下，细胞毒性方法预测100%的化学品属于1 - 4类，但在预测特定危害类别方面仍然有限。

完整结果见表1。

当前基于细胞的细胞毒性分析识别假阳性结果的潜力引发了进一步的调控在活的有机体内研究。本研究的结果表明，TruLarvTM模型可能优于这些在体外低毒化学品的预测方法。在欧洲化学品管理局(ECHA)指南中添加该模型作为证据权重方法的推荐元素，可以加强注册人证明放弃的选择在活的有机体内对化学物质的急性口服毒性研究预计毒性低，并导致用于毒性试验的动物数量减少。

具体来说，ECHA批准的低化学毒性的可靠非动物技术(NAT)预测器的3Rs影响可能会减少OECD 420急性口服毒性研究的数量。OECD 420要求每项研究至少有5只动物。2017年，在Envigo进行了大约150项OECD 420研究，使用了大约900只动物。这些动物中95%的动物有轻微的严重程度评级，这表明测试的化学物质总体上是低毒的。基于TruLarv是ECHA批准的综合检测方法的一部分，估计在合理放弃检测后，动物检测需求可能会减少50%(约450只动物)。

包含四列不同化合物的表格。急性口服，计算LD, 3T3 NRU IC和NHK NRU IC 欧盟GHS类别表一至四

表1:急性口腔LD的一致性50通过TruLarv™预测的危害类别和基于细胞的细胞毒性分析，使用GHS对数值进行分类。

出版物

爱兰歌娜号信用证et al。(2018)。广场mellonella幼虫允许区分有毒和无毒化学品。光化层198:469 - 472。doi: 10.1016 / j.chemosphere.2018.01.175．

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