TruLarv Galleria mellonella -感染研究、毒性测试和药物开发的模型宿主(与Demuris合作)

广场mellonella在过去的五年中，幼虫已被广泛用于微生物感染的非哺乳动物模型和抗菌药物筛选。的优点g . mellonella与其他无脊椎动物模型相比，幼虫的能力包括在37°C下进行实验，并通过向确定的位置注射药物/微生物来精确地给单个幼虫剂量。然而，由于在批次内和批次之间幼虫的行为发生了重大变化，该模型的使用受到了限制。

生物系统技术有限公司的团队开发了TruLarv;研究级广场mellonella它们都是在没有使用抗生素或其他药物的情况下，从一个gemone测序的繁殖地获得的体重和年龄确定、表面净化和自交系。因此，它们的行为比其他来源(如宠物店)的幼虫更稳定和可复制。

通过CRACK IT Solutions, BioSystems Technology Ltd寻求与抗菌药物研发相关的合作伙伴，将TruLarv整合到他们的筛选平台中。他们现在正与抗生素发现公司Demuris合作，该公司拥有大量独特的放线菌，人们认为放线菌可以生产全新的抗菌药物。

生物系统技术有限公司通过CRACK IT Solutions获得资金，与Demuris合作，利用TruLarv模型筛选粗放线菌提取物，以寻找潜在的新型抗菌药物。这种方法作为一种早期毒性和疗效筛选方法的成功验证，将有助于快速选择有前景的先导化合物，并确保不将低效化合物用于动物研究。

关于这个CRACK IT解决方案的详细信息可以在破解它的网站。

在这个原理证明的研究中，从Demuris收集中选择了50个粗放线菌提取物，它们已经显示了一些对琼脂的抗菌活性和潜在的新的作用模式。这些粗提取物具有未知的毒性和功效在活的有机体内这些数据对Demuris选择最有希望的主要目标至关重要。在本研究中，利用g . mellonella作为一种预测这些提取物的疗效和毒性的筛选工具，已被评估。

在活的有机体内TruLarv™中复杂细菌提取物的毒性测量

TruLarv™被用作评估复杂细菌提取物急性毒性的早期筛选。在急性毒性试验中，以5组TruLarv™筛选41个粗提物(CE1-41)，以攻毒后24小时、48小时和72小时的幼虫存活率作为终点。

在活的有机体内TruLarv™中复杂细菌提取物的功效测量

提取物之前已筛选革兰氏阴性和革兰氏阳性抗菌活性在体外使用椎间盘扩散试验。初步选择了7种粗提物进行进一步筛选在活的有机体内对革兰氏阴性病原体的抗菌活性铜绿假单胞菌(CE29、CE30和CE31)和革兰氏阳性病原体金黄色葡萄球菌(CE38, CE39, CE40, CE41)。来确定在活的有机体内分别以10μl的水提液同时作用于幼虫铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌在一个前腿和10μl粗提物在另一个前腿。感染后19小时测定幼虫存活率。三种粗提物中，CE29和CE30均表现出较强的抑菌活性铜绿假单胞菌提取的CE39和CE40对小鼠均有抑制作用金黄色葡萄球菌。

在初步筛选的基础上，通过多轮色谱分离和随后的LC-MS分析，筛选出若干提取物进行化合物鉴定和重复。这一过程确定提取物CE41含有广谱抗生素帕罗霉素，表明其潜力g . mellonella识别重要抗生素的模型。其他提取物的活性化合物的鉴定和重复正在进行中。

采用相同的化合物鉴定和重复分析方法，发现提取物CE30(具有抗菌活性铜绿假单胞菌)产生一种新的潜在的抗菌化合物。此外，来自细胞培养试验的细胞毒性数据与TruLarv产生的数据相关^TM，进一步展示香港的发展潜力g . mellonella模型识别新的抗菌产品，并准确预测疗效和毒性概况。

TruLarv在早期阶段的使用将使我们能够选择有希望的导线进行进一步的脊椎动物试验，从而显著减少用于药物开发的脊椎动物数量。例如，一个单一化合物的PK/PD研究使用14剂，每剂3只老鼠，需要42只老鼠加上对照组6只老鼠(每项研究总共48只老鼠)。平均每年在Demuris进行2次PK/PD研究，因此通过使用TruLarv，每年可以替代近100只动物进行这些研究。在毒性研究中，4个剂量的化合物，每剂量3只老鼠，需要12只老鼠，加上对照组的6只老鼠，每项研究总共18只老鼠。平均每年在Demuris进行5次毒性研究，因此，通过使用TruLarv™，每年可以替代近200只动物进行这些研究

Demuris有限公司的首席科学官Nick Allenby博士说:“通过这个nc3rs资助的项目，Demuris已经能够使用g . mellonella作为放线菌产生的抗生素化合物早期毒性评价的模型系统。该模型使我们能够获得有价值的早期毒性测量结果，使我们能够优先考虑兴趣菌株，以便进一步开发。在这个项目之后，Demuris将继续使用我们现在正在使用的毒性评估模型g . mellonella评价我们的抗生素化合物对一系列细菌病原体的疗效。能够以这种方式对化合物进行优先排序，将使我们能够做出更好的决定，并减少进入监管动物研究的化合物数量。”

了解更多关于TruLarv的信息^TMg . mellonella访问生物系统技术