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NC3Rs:国家动物替代、改良和减少研究中心
项目资助

通过多种抗原免疫程序减少动物使用

试管:装有有色液体的试管集合

乍一看

完成
合同日期
2005年10月- 2007年9月
资助金额
£100253
首席研究员
西蒙史密斯博士

研究员(s)

  • 布莱恩·霍华德博士
研究所
谢菲尔德大学

R

  • 减少

内容

应用抽象

抗体是重要的生物分子,在临床诊断和生物学研究中有着广泛的应用。其生产的常规方案包括用单个目标免疫动物以引起免疫反应,随后,从血清中获取抗体(多克隆抗体)或使高免疫的脾脏细胞永生,以产生对目标抗原具有单一特异性的抗体(单克隆抗体)的细胞系。我们的项目是为了减少程序上的动物数量,并通过将多种抗原共同注射到单一动物的策略来实现。对于多克隆血清,随后的步骤包括亲和纯化样品,以产生与用单抗原免疫的动物获得的抗体产量和特异性相似的抗体,而对于单克隆抗体,广泛筛选永生脾脏细胞(杂交瘤)群体,以识别表达抗体的细胞系,以确定对多重抗原的每个单一成分的识别。我们的研究表明,在单抗原免疫引起强烈反应的程序中,平行的多组分免疫引起类似的反应。随后,用多种抗原免疫的动物血清的亲和层析得到的纯抗体高达70%,与用单一抗原免疫的对照动物得到的纯抗体相比,具有相似的疗效和特异性。此外,我们成功地从共注射2和3种抗原的小鼠中选择了分泌单克隆抗体的杂交瘤菌落,该单克隆抗体具有精确的结合特性。该研究提出了一些有趣的后勤问题,这些问题与包含许多不同的抗体生产制度的服务许可证特别相关;具体来说,在一种成分比其他成分诱发反应更快的情况下,引入充分的多成分抗原而不影响许可参数和时间尺度考虑的重要性,需要对后者进行进一步的提高。只要研究项目允许减少用于抗体生产的动物数量,我们就会继续使用这项技术。

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